بررسی اثر سینرژیزم واکسن غنی از پروتئین شوک حرارتی واریانتی از gp96 (variant of gp96 rich lyset) و نالوکسان جهت ایمونوتراپی تومور فیبروسارکوما در موش های balb/c

پایان نامه
چکیده

خانواده گلیکوپروتئین های 96 کیلودالتونی یا gp96، بخشی از پروتئین های شوک حرارتی هستند. این مولکول ها به طور ذاتی حامل پپتیدهای سلولی بوده و در مورد سلول های سرطانی حاوی پپتیدهای آنتی ژنیکِ این سلول ها هستند. این مولکول ها با موفقیت در ایمونوتراپی سرطان بکار برده شده اند. نالوکسان یک آنتاگونیست عمومی اپیوئیدهاست که جدیداً به عنوان آجوانت معرفی شده است. این مولکول با اتصال به گیرنده های اپیوئیدی در سطح سلول های ایمنی، اثر تنظیمی قوی بر پاسخ های ایمنی اعمال کرده و القاء کننده قوی پاسخ از نوع th1 می باشد. هدف این مطالعه، ارزیابی اثر سینرژیزم نالوکسان با gp96 مشتق از تومور در ایمونوتراپی سرطان می باشد. برای تهیه پروتئین gp96 توموری از روش سه مرحله ای استفاده گردید. برای آنالیز پروتئین ها از روش sds-page و وسترن بلات استفاده شد و ماهیت پروتئین با استفاده از آنتی بادی منوکلونال بر روی غشاء pvdf تایید گردید. سپس، از طریق تزریق سلول های wehi-164 به موش ها، تومور تجربی در آنها ایجاد شد. موش های توموری، در چهار گروه، چهار ترکیب مختلف pbs، نالوکسان، gp96 و نالوکسانgp96+ را از طریق زیرجلدی دریافت کردند. برای ارزیابی تاثیرات واکسن، حجم تومور مرتباً اندازه گیری شد. تست های تکثیر لنفوسیتی با mtt، سایتوتوکسیسته با روش ldh و تولید ifnγ, il-4 با روش الایزا بر روی سلول های طحالی انجام گردید. درصد جمعیت های سلولیt cd4+ ، t cd8+ و t cd4+cd25+foxp3+ در بافت طحال و تومور با روش فلوسایتومتری تعیین گردیدند. نتایج : باند پروتئین gp96 تخلیص شده در محدوده 66 کیلودالتون قرار داشت. نتایج ایمونوتراپی با gp96 و نالوکسان نشانگر آن است که میزان کاهش رشد تومور در روزهای 27 و 32 در این گروه به طور معنی داری بیشتر از گروه gp96 تنها می باشد. درصد سلول های t cd4+cd25+foxp3+ در طحال و تومور این گروه در مقایسه با گروه های کنترل کاهش معنی دار داشت. استفاده توأم این دو، موجب افزایش معنی دار سلول های cd8+ در تومور و افزایش معنی دار سایتوتوکسیسیته لنفوسیت های طحالی در مقایسه با گروه دریافت کننده gp96 تنها گردید. نتایج این تحقیق نشان می دهد که نالوکسان در ایمونوتراپی تومور اثر سینرژیزم با gp96 داشته و به عنوان یک آجوانت کارآمد می تواند به کار گرفته شود.

۱۵ صفحه ی اول

برای دانلود 15 صفحه اول باید عضویت طلایی داشته باشید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

ارزیابی پرولیفراسیون سلولی و اندازه گیری سطح اینترلوکین چهار و اینترفرون گاما در موش های Balb/c دارای تومور تجربی فیبروسارکوما با استفاده از ترکیبات آنتی ژنی GP96-Tumor peptide و نالوکسان

Background and purpose: In spite of the increasing progress in tumor treatment by current methods like surgery, chemotherapy and etc, medical sciences are unable to treat tumors. In this respect, immunology has opened a new window for tumor treatment nowadays tumor immunotherapy is an accepted strategy for treatment of some tumors at least in some animal models. The goal of this study is the ...

متن کامل

ساخت dna واکسن واجد پروتئین شوک حرارتی gp96 و her2 بعنوان یک کاندید در ایمنوتراپی سرطان سینه her2 مثبت

واکسنهای پلاسمیدی موجب ایجاد پاسخهای ایمنی علیه تومور در مدلهای آزمایشگاهی شده است. آنتی ژن مورد استفاده، از میان آنتی ژنهائی که در تومورها به میزان زیاد بیان می شوند، انتخاب شده اند که از جمله این آنتی ژنها می توان از her2/neu نام برد. با این حال، ایمنی درمانی با استفاده از این ملکول کارآئی محدودی داشته است، که به دلیل تحمل ایمنولوژیک به این ملکول می باشد. استراتژی های زیادی مانند اتصال یا تجو...

بررسی اثر ضد توموری دندریتیک سلهای +cd8? پالس شده با لیزات توموری شوک حرارتی، جهت ایمونوتراپی تومور فیبروسارکوما در موش های balb/c

زمینه و اهداف: بکارگیری از سلولهای دندریتیک به عنوان ادجوانت های سلولی یکی از اهداف ایمونوتراپی سرطان را فراهم می نماید. ما در این تحقیق اثر ایمونوتراپی با سلولهای دندریتیک cd8?+بار شده به تومور لیزات شوک حرارتی را مورد بررسی قرار دادیم. مواد و روش ها: موشهای balb/c، ده روز قبل ازایمونیزاسیون با سلولهای دندریتیک cd8?+، با تزریق رده سلولی فیبروسارکوما wehi-164)) به صورت زیر پوستی مبتلا به توم...

پروتئین شوک حرارتی؛ کاندید واکسن سرطان

Background: Tumor cells express antigens that can be recognized by immune system as foreign particles. Heat shock proteins (HSPs) are molecular chaperones that bind to tumor antigens and mediate their uptake into antigen presenting cells. Methods: This articles is a review article and its data has been collected and categorized from the articles in the field of cancer immunotherapy. All the ar...

متن کامل

جداسازی و تعیین برخی خصوصیات ایزو فرم غالب مولکول GP96 از رده سلولی فیبرو سارکومای موش (WEHI-164)

GP96 جزئی از پروتئین‌های شوک حرارتی است که نقش فراوانی در ایمنی سلولی علیه تومور دارد. آن در رده توموری، نشانه تسلط بیشتر ایمنی بدن به آن تومور است.جهت خالص سازی ایزوفرم غالب مولکول GP96  از رده  توموری  فیبروسارکومای موش، سلول‌های حاصل از کشت رده سلولی WEHI-164  لیز شده و مایع رویی حاصل از عصاره سلولی با سولفات آمونیوم رسوب داده شد. سپس با استفاده از کروماتوگرافی میل جذبی و کروماتوگرافی تعویض ...

متن کامل

GP96: safeguarding Treg

FOXP3 positive regulatory T cells (Tregs) are key players in maintaining peripheral immune tolerance. Multiple molecules and signaling pathways are involved in regulating Treg function. Understanding these mechanisms is vital to designing Treg-targeted immunotherapeutic strategies for cancer and other diseases. A recent study uncovered that endoplasmic reticulum resident chaperone, gp96, is ess...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023